給您 介紹一下細胞培養所用到的設備,而其中
液氮罐也是屬于其中的一個重要設備。
一、培養設備
1. 無菌室:為相對密封、防塵、防菌的空間。一般由更衣間、緩沖間和操作間組成(P29)。使用前紫外照射1-2h,每周甲醛、乳酸或過氧乙酸熏蒸2h和每月新潔爾滅檫拭地面和墻壁一次。
2. 超凈工作臺:為無菌操作裝置,有測流、外流和直流式三種。使用前紫外照射10-30min,使用后70%酒精檫拭臺面,定期福爾馬林熏蒸。
3. CO2培養箱:用于培養細胞。按要求恒定供給CO2(5%)、保持穩定的溫度(37℃)、pH值(7.2-7.4)和飽和濕度(95%)。
二、細胞觀察與計數設備
1. 倒置顯微鏡:定期檢查細胞生長情況。
2. 細胞計數板和電子細胞計數儀:用于計算細胞數目。
三、細胞保存設備
液氮生物容器:俗稱液氮罐,標準大氣壓下其內溫度可低至—190℃,適用于細胞、組織的長期凍存。罐口不密封,要定期加注液氮,加液氮和取材料時要注意保護好眼睛和手腳。
四、消毒滅菌相關設備
1. 壓力蒸汽消毒器:可殺滅包括芽胞在內的所有微生物,是滅菌效果**、應用最廣的滅菌方法。方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋內(物件不宜過多),加熱時蒸汽不外溢,高壓鍋內溫度隨著蒸汽壓的增加而升高。在103.4kPa蒸汽壓下,溫度達到121.3℃,維持15~20分鐘可達滅菌目的。適用于普通培養基、生理鹽水、手術器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。使用時要注意鍋內的水位,取物時要檢查壓力是否為零。
2. 無菌過濾器:為除菌設備,分反復適用型和一次性過濾器,使用時一般用微孔直徑0.22μm的濾膜。
3. 酸缸:用于去除玻璃器皿壁上的污物。缸內的清潔液(具強腐蝕性,加取物件時需戴膠手套穿長袖工作衣)的配置:稱取一定量的重鉻酸鉀,于干燥研缽中研細,將此細粉加入盛有適量水的玻璃容器內,加熱,攪拌使溶解,待冷后,將此玻璃容器放在冷水浴中,緩慢將濃硫酸斷續加入,不斷攪拌,勿使溫度過高,容器內容物顏色漸變深,并注意冷卻,直至加完混勻。
4. 電熱恒溫干燥箱:用于烘干和干熱消毒玻璃器皿。注意烘烤物件時一般溫度不能超過60℃,烘干后要及時轉移物件。
五、移液設備
1. 微量移液器(俗稱“槍”)及槍尖:微量移液器分多通道和單通道,單通道常用的規格有0.5-10µl、5-100µl、20-300µl、50-1000µl 和100-5000µl。槍尖有藍色(1ml)、黃色(200µl)和白色(20µl)三種。
2. 玻璃移液器與洗耳球、細胞吹打管與膠塞。
六、細胞實驗相關其他設備
1. 流式細胞儀:在功能水平上對單細胞進行定量分析和分選的檢測手段,它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,與傳統的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。
2. 多功能酶標儀:用于檢測溶液的吸光度值。其本質就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計,基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。分為單通道和多通道2種類型。
3. 離心機及離心管:用于分離、傳代和處理細胞,轉速通常在500-5000rpm,離心體積為0.5-50ml不等。
4. 純水蒸餾器:分蒸餾式和過濾式。
5. 超聲波清洗機:對精密工件上的空穴、狹縫、凹槽、微孔、暗洞等處,通常的洗刷方法難以見效,使用超聲清洗卻可以達到良好的效果。對質地較硬、聲反射強的材料清洗效果較好(如金屬、玻璃、陶瓷、塑料)。
七、常用培養器皿
1. 玻璃瓶:分配翻蓋膠塞的鹽水瓶和配塑料螺旋蓋的盛液瓶。規格有500ml、250ml、100ml和50ml。
2. 培養瓶:主要用于培養細胞。常用的規格有15ml、25ml、75ml、100ml、200ml、275ml、500ml和1000ml等。
3. 培養皿:按直徑分30ml、60 ml、100 ml、150 ml和300 ml。
4. 培養板:根據孔數分6孔(底面積為9.6cm2、加培養液為2.5ml)、12孔(底面積為4.5cm2、
加培養液為2.0ml)、24孔(底面積為2cm2、加培養液為1.0ml)和96孔(底面積為0.32cm2、加培
養液為0.1ml)。
液氮罐